T. thermophilus HB8 を 70℃ の TT 液体培地 で振とう培養

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0.5 x 10^8 匹/ml 程度まで増えたらプラスミドを加える

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そのままさらに 2 時間ほど振とう培養

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50 ug/ml のカナマイシンを含む TT 寒天培地に菌をまく